層析柜是一種高分離率、高靈敏度和高選擇性的分離方法
更新時間：2024-02-02 點擊次數(shù)：4830
層析柜是一種用于分離和純化樣品的設備，它采用了層析技術(shù)，這是一種具有高分離率、高靈敏度和高選擇性的分離方法。
使用原理：
生物分子間存在很多特異性的相互作用，它們之間都能夠?qū)Ｒ欢赡娴慕Y(jié)合，這種結(jié)合力就稱為親和力。親和層析就是通過將具有親和力的兩個分子中一個固定在不溶性基質(zhì)上，利用分子間親和力的特異性和可逆性，對另一個分子進行分離純化。被固定在基質(zhì)上的分子稱為配體，配體和基質(zhì)是共價結(jié)合的，構(gòu)成親和層析的固定相，稱為親和吸附劑。親和層析時首先選擇與待分離的生物大分子有親和力物質(zhì)作為配體，并將配體共價結(jié)合在適當?shù)牟蝗苄曰|(zhì)上。將制備的親和吸附劑裝柱平衡，當樣品溶液通過親和層析柱的時候，待分離的生物分子就與配體發(fā)生特異性的結(jié)合，從而留在固定相上；而其它雜質(zhì)不能與配體結(jié)合，仍在流動相中，并隨洗脫液流出，這樣層析柱中就只有待分離的生物分子。通過適當?shù)南疵撘簩⑵鋸呐潴w上洗脫下來，就得到了純化的待分離物質(zhì)。
設備結(jié)構(gòu)：
層析柜通常由以下幾個部分組成：外殼、工作區(qū)域、控制系統(tǒng)等。外殼通常由金屬或耐酸堿塑料制成，主要目的是保護工作區(qū)域，防止外界污染，并提供便于清洗和消毒的表面。工作區(qū)域通常由內(nèi)襯不銹鋼的工作面板、前玻璃門、風道系統(tǒng)和高效過濾器組成，風道系統(tǒng)和高效過濾器可過濾空氣，并將潔凈空氣輸送至工作區(qū)域，防止外部雜質(zhì)進入。控制系統(tǒng)則由電子和機械部件組成，包括紫外線照射器、通風機和風量計等，可保證工作區(qū)域的負壓狀態(tài)，確保污染物向?qū)游龉裢獠颗欧拧?br />
操作步驟：
層析柜的使用操作包括以下幾個步驟：樣品的準備和處理、層析柱的安裝和平衡、上樣和洗脫、收集和檢測。在操作過程中，需要注意避免樣品污染和交叉污染，同時要控制好流速和溫度等參數(shù)，保證分離效果和實驗結(jié)果的準確性。
注意事項：
層析柜在使用過程中需要注意以下幾點：首先，要嚴格按照操作規(guī)程進行操作，避免人為失誤導致的實驗失敗；其次，要保持設備的清潔和衛(wèi)生，避免樣品污染和交叉污染；第三，要定期對設備進行維護和保養(yǎng)，保證其正常運轉(zhuǎn)和使用壽命；最后，要注意安全問題，如避免超壓運行、避免使用未經(jīng)批準的化學品等。
